Het schilderij toont Sint Anna en haar dochter Maria samen met het kindje Jezus. Hoewel er geen schilderij bestaat dat rechtstreeks is beïnvloed door Leonardo da Vinci's eerdere tekening 'The Burlington House Cartoon', zijn er op de achterkant hiervan schetsen gevonden die suggereren dat hij zijn ideeën voor De Maagd met Kind met St Anne op de achterkant van de originele tekening van deze cartoon.
Infraroodtechnologie die door experts werd gebruikt, vond tal van dingen op de achterkant van de tekening, waaronder een paardenhoofd en een tekening van Jezus die met een lam speelde die leek op het brandpunt van het schilderij dat later kwam. Het schilderij is olieverf op hout en zou omstreeks 1503 zijn geschilderd. De figuren in Leonardo da Vinci's 'De Maagd en het Kind met Sint-Anna' liggen ongelooflijk dicht bij elkaar en tonen de hechte band die niet alleen Maria had met het kindje Jezus, maar ook met Sint-Anna.
Dit is misschien om de kijker te laten zien hoe gemakkelijk het voor iemand is om dicht bij de Zoon van God te komen. Jezus die interactie heeft met het lam in plaats van met zijn familieleden, toont mogelijk zijn vriendelijkheid aan alle levende wezens.
Lammeren worden vaak gebruikt in schilderijen die betrekking hebben op Jezus, aangezien het lam van God een zeer bekende uitdrukking is die in de bijbel voorkomt. Bijzonder aan het schilderij is het feit dat Maria op de schoot van Sint-Anna zit. Hoewel Sint-Anna de moeder van Maria is, was dit in die tijd niet gebruikelijk.
In feite is door de geschiedenis heen vrouwen die op de schoot van andere vrouwen zitten niet iets waarvan bekend was dat het onder alle omstandigheden gebeurde. Veel geleerden hebben ruzie gemaakt over de betekenis hiervan, maar het is waarschijnlijk dat de da Vinci gewoon een menselijk familie-element aan de foto wilde toevoegen om het bescheiden begin te laten zien waar Jezus vandaan kwam.
De Maagd en het Kind met Sint-Anna wordt tentoongesteld in de Lovure en is ongetwijfeld een van hun meest trotse da Vinci-stukken. Hierdoor zijn er veel controverses geweest over hoe het schilderij schoongemaakt moet worden - of helemaal niet. In 2011 hebben twee prominente medewerkers ontslag genomen uit de galerie vanwege de schoonmaak van het schilderij.
Nadat het schilderij was schoongemaakt, werd het een stuk helderder, wat duidelijk gemakkelijker was voor de kijker, maar er is beweerd dat deze helderheid niet was wat Leonardo da Vinci eigenlijk voor het schilderij had bedoeld. Terwijl twee medewerkers ontslag namen vanwege de schoonmaak, hebben andere medewerkers en wetenschappers betoogd dat dit de juiste keuze was.
Een van de directeuren die toezicht hield op de restauratie was een van de medewerkers die aftrad, maar sinds dit in 2011 gebeurde, hebben veel critici de restauratie gesteund en gezegd dat het beter is dat het schilderij langer meegaat.
