Es ist eines seiner unvollendeten Gemälde, das derzeit in den Vatikanischen Museen in Rom aufbewahrt wird. Leonardo arbeitete an diesem Gemälde im Jahr 1480, einer Zeit großer Turbulenzen in seinem Leben. Dieses Tempera-Öl auf Walnussholz hat eine Abmessung von 41 Zoll x 30 Zoll. Auch wenn Teile des Gemäldes skizzenhaft sind, hat es doch eine große Bedeutung und gibt einen unverkennbaren Einblick in die Arbeitsweise und Struktur des Meisters. Das Gemälde zeigt den heiligen Hieronymus, einen christlichen Gelehrten und Historiker, der vor allem für seine Übersetzung der meisten Teile des hebräischen Evangeliums ins Lateinische bekannt war. Hieronymus war bekannt für seine Lehren über christliches moralisches Leben, die Menschen, die in kosmopolitischen Zentren wie Rom lebten, in die christliche Lebensweise führten und einführten.
Er richtete seine Aufmerksamkeit besonders auf das Leben von Frauen und lehrte sie, wie sie ihr Leben als Anhänger Christi führen sollten. Dieses Kunstwerk zeigt den heiligen Hieronymus in der syrischen Wüste, wo er nach seinem Rückzug aus der Gesellschaft als Asket lebte. Die Landschaft dieses speziellen Gemäldes zeigt ein felsiges Gelände und der heilige Hieronymus sitzt auf einer Felsoberfläche in der Nähe einer höhlenartigen Struktur. Jerome scheint auf ein schwach gezeichnetes Kruzifix ganz oben rechts auf dem Gemälde zu blicken. In seiner ausgestreckten rechten Hand hält er einen kleinen Stein, mit dem er sich auf die Brust schlagen will. Damals galt diese Handlung als eine Form der Buße. Der Hintergrund zeigt felsige und neblige Berge, die sich in die Weite erstrecken.
Das Gemälde zeigt großartige anatomische Details, die Leonardos umfassendes Wissen über die menschliche Anatomie zeigen. Der Heilige trägt ein langes Stück Stoff, das er um sich drapiert. Die Muskeln und Knochen sind unter der dünnen Fleischschicht deutlich sichtbar. Der Körper sieht aus, als gehöre er einem jungen Mann, aber das Gesicht ist das eines alten Mannes. Die Wangen-, Nacken- und Schultermuskulatur sind genaue anatomische Darstellungen. Das Gesicht ist aufgrund von Fasten und Reue eingefallen, doch sein Blick ist entschlossen und unerschütterlich. Auf dem Boden neben Jeromes Füßen sitzt ein Löwe, der seine Handlungen beobachtet. Die Körpersprache des Löwen ist lässig und ähnelt der eines Haustiers. Der Legende nach wurde der Löwe sein treuer Begleiter, nachdem der Heilige ihm half, indem er ihm einen Dorn aus den Pfoten entfernte. Das Gemälde hat eine interessante und fast unglaubliche Geschichte. Es war ursprünglich Teil der Sammlung des Vatikans und kam dann unter die Obhut von Angelica Kaufmann.
Es wurde dann unwissentlich als weggeworfenes Holz verwechselt und jemand zerschnitt es in zwei Teile. Einer der Teile wurde in eine Tischplatte umgewandelt, während der andere Teil in die Hände eines Schuhmachers fiel, der ihn als Oberteil eines Hockers verwendete. Später erkannte Napoleon Bonapartes Onkel Joseph Kardinal Fesch das Tafelbild im Jahr 1820 wieder, da er bereits an anderer Stelle eine Replik des Gemäldes gesehen hatte. Er kaufte dieses Teil von dem römischen Trödelladen, wo er es fand. Das andere fehlende Stück konnte er einige Jahre später lokalisieren. Das Gemälde wurde restauriert, wobei der Schnitt noch sichtbar war. Nach einigen Jahren kam es wieder in den Vatikan zurück, als die Erben von Kardinal Fesch das Gemälde an Papst Pius IX. verkauften.